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组织RNA保存液 （RNA Later）

产物描述

组织RNA保存液（RNA Later）（下文简称“RNA Later"）是一种液态、无毒的组织保存试剂，能迅速稳定组织，保护非冷冻细胞RNA于原位且不会导致RNA的降解。可广泛应用于多种脊椎动物样本（包括脑、心、肾、脾、肝、睾丸、骨骼肌、脂肪、肺和胸腺），对大肠杆菌、果蝇、组织培养细胞、全血细胞和一些植物也有效。

RNA Later不会影响样品的后续处理，可以配合各种常见的 RNA抽提试剂盒使用，例如TRIzol（Cat#AN51L758）、RNAzol、各种RNA提取试剂盒、酚抽法以及利用Oligo（dT）原理的mRNA抽提试剂。

订购信息

运输与保存

常温运输。常温保存，有效期12个月。

使用方法（只能用于新鲜组织，在浸入RNA Later之前不能冷冻组织）

1. 根据要保存的各样本的体积，计算出所需RNA Later用量（应当是组织体积的5倍；离心收集2×10⁶细胞RNA Later的用量是1mL）。

2. 将RNA Later按需要量分装入自备保存管中。

3. 快速将较大的组织切成切割至每个方向（长度、宽度或厚度）均<0.5 cm，立即浸入RNA Later中（确保RNA Later能够渗透组织）。较小的组织（如大鼠的肾脏、脾脏，小鼠的大部分器官）取下后可以直接浸入RNA Later。

4. 保存时先将样本浸入RNA Later后置4℃冰箱过夜（4℃过夜是必需的，这样可使RNA Later渗入到组织中），然后去除上清液（也可留存），再转移至-20°C或-80°C进行长期保存。

注：样本在-20℃条件下不会冻结，但在存贮缓冲液中会有结晶形成，这并不影响随后的RNA提取。样本在-80℃条件下会冻结，测试表明，在RNA Later中保存的标本，反复冻融至室温20次不影响RNA的质量。

5. RNA Later 中样本的RNA提取：

(1)       组织：用消毒镊子将组织从存贮溶液RNA Later中取出，浸泡在RNA提取溶液中。一旦将组织放入RNA提取溶液中，匀浆一定要迅速进行。

(2)       细胞：从存贮在RNA Later中的细胞中提取RNA有两种操作方法可供选择：去除RNA Later或者从细胞与RNA Later的混合物中直接提取RNA。

注意事项

1. 本产物仅限于科学实验研究使用，不得用于临床诊断、治疗等领域。

2. 本产物在4℃条件下会引起沉淀，加热到37℃即可澄清。

3. 使用RNA Later：

(1)       动物组织：RNA Later不会溶解或破坏组织样本的结构。如果需要的话，仍可将已经平衡在RNA Later溶液中的组织取出并分割成更小的块再重新放入到RNA Later中。

(2)       植物组织：许多植物组织可以简单浸泡在5倍体积的RNA Later中保存。具有自然屏障防止扩散的植物如蜡表皮的叶组织可能需要先破坏其屏障，以允许RNA Later进入组织。

(3)       培养细胞：沉淀细胞，先用PBS洗一次，再用少量的PBS悬浮细胞，然后加5~10倍体积的RNA Later保存。

(4)       白细胞：如果将白细胞从红细胞和血清中分离出来，并按组织培养细胞一样处理后，白细胞便能有效地保存在RNA Later中。不要将全血、血浆或血清中的RNA保存在RNA Later中，因为它们蛋白含量过高，与RNA Later混合后易形成不溶的沉淀。

(5)       细菌：RNA Later是抑菌的，虽然细菌在RNA Later中不能生长，但细胞仍保持其完整性。大肠杆菌保存在RNA Later中4℃条件下1个月仍很完整，产生不降解的RNA。

4. 去除RNA Later：因为RNA Later的浓度比典型的细胞培养介质的浓度高，因此用通常沉淀活细胞的离心力无法沉淀RNA Later中的细胞（HeLa细胞大约需要5000g）。

5. 对于多数在 RNA later 溶液样本，在缺乏-20°C或-80°C长期保存条件时，RNA样本可通过以下方式短期保存： ①4°C保存长达 1 个月，RNA 不会出现显着降解；②25°C保存长达 1 周，RNA 质量不会显着下降。但2 周后，RNA 通常会出现轻微降解（尚可满足 Northern 印迹分析的基本要求，仍适用于核酸酶保护实验或 RT-PCR 分析）；③37°C下24小时内RNA完整，3天后部分降解。

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